百日咳絲狀血凝素(標(biāo)準(zhǔn)品)

產(chǎn)品時(shí)間：2022-03-03

簡(jiǎn)要描述：

NIBSC JNIH-4 百日咳絲狀血凝素(標(biāo)準(zhǔn)品)旨在用于表征來(lái)自不同來(lái)源的無(wú)細(xì)胞百日咳疫苗。它最初由丹麥哥本哈根的 Statens Serum Institut (SSI) 舉辦。自 1997 年 7 月 1 日起，英國(guó)國(guó)家生物標(biāo)準(zhǔn)與控制研究所 (NIBSC) Potters Bar 成為該材料的保管人和分銷商

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非 WHO 參考材料

百日咳博德特氏菌，絲狀血凝素 (FHA)

NIBSC JNIH-4

DNA提取方法:
一.酚抽提法：先用蛋酶K、SDS破碎細(xì)胞，消化蛋白，然后用酚和酚-氯DNA大小為100-150kb
二.甲酰胺解聚法：破碎細(xì)胞同上，然后用高濃度甲酰胺解聚蛋白質(zhì)與DNA的結(jié)合，再透析獲得DNA可得DNA200kb左右。
三.玻璃棒纏繞法：用鹽酸胍裂解細(xì)胞，將裂解物鋪于乙醇上，然后用帶鉤或U型玻璃棒在界面輕攪，DNA沉淀液繞于玻棒。生成DNA約80kb。
四.異丙醇沉淀法：基本同1法，僅用二倍容積異丙醇替代乙醇，可去除小分子RNA（在異丙醇中可溶狀態(tài)）
五.表面活性劑快速制備法：用Triton X-100A或NP40表面活性劑破碎細(xì)胞，然后用蛋白酶K或酚去除蛋白，乙醇沉淀或透析。
六.加熱法快速制備：加熱96℃-100℃，五分鐘，然后離心后取上清，可用于PCR反應(yīng)。
七.堿變性快速制備：先用NaOH作用20分鐘，再加HCI中和，離心后取上清，含少量DNA

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